重庆图书馆

第六章 腦脊髓液檢查法
   第一節 一般檢查
   一、色調：
  
   二、清濁：
  
   三、反應：弱鹼性(PH 7.4—7.6)。
   四、比重：正常為1.006—1.008，少量時不直接用比重計測定，先作比重液，以上述方法測定之。
   方法：在圓柱玻璃筒內加入Benzene及Chloroform等量混合，滴下腦脊髓液一滴，如下沉則加Benzene，如上浮則加Chloroform，務使腦脊髓液浮於圓柱玻筒之中央而止，然後以比重計測定之，即為腦脊髓液之比重(Benzene比重=08.7，Chloroform比重二1．489)。
   五、粘稠度1.01—1.06
   第二節 正常成份
   白血球：白血球數普通1—9個，10以上為病的，主要為小淋巴球，亦有時為中淋巴球，內皮細胞少見。
   正常者無赤血球(但在穿刺時，有傷及小血管而混入者，要注意)。
   一、計算法：
   腦脊髓液採取之後，即刻施行檢查，否則細胞溶解，成績不確，用血球計算器的吸管先吸取Tuerk氏試藥（與血液中白血球計算的試藥相同），到管的刻度0.1處，再吸取脊髓液到11處，然後用ThomaZ eiss氏血球計算室計算之，其計算法如下：
   (a)ThomaZeiss氏白血球計算室的全容積為1mm×lmm×0.1m m（寬×長×深）二0．1立方mm。
   （b)計算液量為0.1立方mm；其中所含的細胞數以(n)表示之。
   (c)腦脊髓液為〓的稀釋。
   (d)1立方mm腦脊髓液內的細胞數，則等於下列公式：
   (n)×〓X10二(n)×11
   例：在白血球計算室全部有3個細胞，則(n)二3
   所以(n)×〓×10=3×〓×10=3×11=33（在1立方mm腦脊髓液內含有33個細胞）
   白血球在11個以上時，則為病的增加，按其增加的多少，分為三種程度：11—20輕度增加,21—50中等度增加，51以上高度增加，淋巴球增加，在結核性及梅毒性疾病見之，中性多核白血球增加時，為非結核性腦膜炎的現象。
   二、細胞的染色：
   所需試藥：Giemsa氏液（Giemsa氏液2滴以蒸餾水2c．c.稀釋之）
   方法：取腦脊髓液3—5c．c.置尖底沉澱管內，10分鐘遠心沉澱後，捨其上清液，將沉澱以毛細吸管吸於載物玻片上，作成標本（如血液塗佈然），自然乾燥後，以甲醇2分鐘固定之，用Giemsa氏稀釋液染色30分鐘，然後用蒸餾水洗滌，挾於吸水紙之間乾燥之，鏡檢。 第三節 病的成份
   一、蛋白：總量超過0．03％以上為病態
   Nissl氏法（定量）
   所需試藥：Esbach氏試藥（貯於褐色瓶）
   方法：加入腦脊髓液至Nissl蛋白計的L線（或2），再加入Esbach氏試藥至R線（或3），好好混合後，遠心沉澱30分鐘，計算蛋白的沉澱量。
   注意：1．Nissl的刻度1相常於0．02%蛋白量。
   2．用檢尿的Esbach氏蛋白計亦可，腦脊髓液的蛋白量非常多而液量甚少時，以蒸餾水10倍稀釋後檢查之。
   臨床意義：急性炎症，結核性腦膜炎，梅毒性疾患，則蛋白質顯著增加。此種蛋白質，以球蛋白Globulin居多，檢出時對臨床上頗有意義。於昏腫大腦炎，脊髓炭白質炎，腦腫瘍等時，亦可見蛋白質之增加。
   二、糖：
   所需試藥：0．004％美藍溶液10%氫氧化鉀溶液
   方法：取美藍溶液1c.c．於試管內，加氫氧化鉀溶液3滴，再將腦脊髓液加入，加熱煑沸，使美藍褪色，求其所消費之最小腦脊髓液量，設此量為a，則糖的含量計算式如下：
  
   臨床意義：
  
   三、氯化物：
   所需試藥：甲醇 5％氯酸鉀溶液〓硝酸銀溶液。 方法：取腦脊髓液2c．c．加甲醇18c．c．稀釋之，10分鐘放置後，以濾紙濾過之，取濾液10c．c．加5％氯酸鉀液2—3滴，再用〓硝酸銀液滴定之，至形成褐紅色時為止，以用去的硝酸銀溶液量，計算氯的含量，硝酸銀消費量，以100乘之，即為100c.c．腦脊髓液氯的含量。
   〓硝酸銀液1c.c．相當於氯0．71gm或氯化鈉1.17gm。
   臨床意義：結核性腦膜炎、流行性腦膜炎減少，患腦腫瘤時氯化物次第減少，即表示其病症正在進行中。
   四、球蛋白：正常腦脊髓液中存在極微（腦膜炎、腦梅毒等），Globulin反應為陰性。
   前處置遠心沉澱，將其上澄清液做為被檢液。
   (1 Nonne-Apelt氏法(至0.08％亦能檢出)
   所需試液：飽和硫酸錏液。
  
   方法：取約1c.c.的被檢液，於小試管內，加同量的試藥，混合用重疊法放置3分鐘，檢其溷濁，(溷濁度由球蛋白的量不同而有強弱)。
  
   注意：3分鐘以後，起白濁為Albumin的反應，非Globulin 。
   (2)Pandy氏法（至0．03%亦能檢出）本反應極其銳敏。
   所需試藥：飽和石炭酸溶液
  
   方法：取試藥1c．c.於小試管內，加新鮮的脊髓液1滴，於黑色物質的前方，觀察其有無白濁。
   乳 白 濁（廿）
   帶清白濁(+) 薄白濁(土)
   透 明（一）
   (3，Takata反應
   所需試藥：0.3％食鹽水 10％無水炭酸鈉液
   0.5%二氯化汞液 0.02%復紅液
   方法：（本試驗有兩法，即五管法與一管法）
   五管法：直徑0.6cn小試管5支，於試管架上，各吸取0.3％食鹽水1c．c.於第2．3．4．5.試管內，在1.2.試管內各加入腦脊髓液1c．c．搖動之，從2管吸取1c．c．放入第3管內混合，如此順序稀釋至第5管，吸取1c.c.混合液棄去之，如此在各試管內腦脊鹽液之稀釋為1．〓〓〓〓，各管內復加入10％炭酸鈉液1滴，然後加入Takata試藥0．3c.c．於各試管內（該試藥由0.5％二氯化汞液和0．02％復紅溶液等混和而成），各試管於妥為震盪後，放置於室內，在5.10.15.30．分鐘後，及24小時後，各分別記錄結果，若數分鐘後立即發生沉澱者，此為强陽性反應（卅），15分鐘後發生沉澱者，為中等度陽性反應（廿）30分鐘後為陽性反應(+)，24小時後亦為弱陽性反應(+)，記錄結果可以由綫表示之，在神經梅毒，腦脊髓液之Takata反應，在短時內即可發見大量沉澱。
   一管法：應用Ukeo's改良法，不用復紅溶液，其試液為10％無水炭酸鈉液，與0．5％二氯化汞液，將Ic．c．腦脊髓液放入試管內，然後加入無水炭酸鈉液一滴，二氯化汞液0.1c．c.在5．15.30.60.90．分鐘後記錄結果，立即發生絮狀物及沉澱者，陽性反應（卅），5—30分鐘間，發生大量絮狀物及沉澱者，陽性反應(廿)30分鐘後發生溷濁者，陰性反應（一）。
   一管法與五管法試驗結果，其準確度幾乎相同。
   註：反應之發生，在蛋白質之膠質狀態中，如在腦脊髓液內，二氯化汞與炭酸鈉相混合，即發生膠質溶液，若加數滴復紅溶液，該膠質溶液即呈黃藍色，在中樞梅毒時除紫藍到藍之顏色變化外，尚有膠質沉澱，在結核性腦脊髓膜炎之腦脊髓液，則使發生紅色變化，或無沉澱發生，或使有些微之沉澱，故本法可用於細菌性腦膜炎，與中樞神經系梅毒之鑑別。
   Lange氏金膠溶液試驗法：
   A．玻璃器械清潔法
   1．本反應所用之一切玻璃器械，均以中性硬質為佳。
   2．先以肥皂水洗刷，次以流水冲洗。
   3.復以少量王水洗之(25%HNO31份加25%HC13份，臨用時配製)。
   4．用流水洗去酸性，浸入水內，臨用時取出。
   5．以蒸餾水洗滌兩次．
   6．使用前須用三次蒸餾水洗滌之。
   B．所需試藥：
   1.1%氯化金溶液：氯化金1gm加三次重蒸餾水100c.c.
   2.1％蓚酸鉀溶液；中性蓚酸鉀1gm加三次重蒸餾水100c.c.
   3.1％食鹽溶液：Nacl 1gm加三次蒸餾水100c.c.
   4．0．4％食鹽溶液：Nacl 0.4gm加三次蒸餾水100c.c.
   5.三次重蒸餾水
   6．溶液於臨用時配之，不能久存。
   (1)取燒瓶加新鮮三次蒸餾水100c.c。
   (2)加蓚酸鉀液1c.c．。
   (3)將燒瓶放於石棉墊上，加熱至沸度。
   (4)滅火
   (5)徐徐加入1％氯化金液1c.c.，隨加隨搖。
   (6)此時呈深紅色或褐色之溶液，以透過光線視之，須十分澄清，而成深紅或赭色，且微帶褐色光或金屬光(或更1%Fomalin溶液1 c.c．亦當搖動的徐徐加入)。
   (7)其呈淡藍色或溷濁不消者不能使用。
   (8)此液6c.c.加1%食鹽溶液1.7c.c．經一小時後須完全沉澱。
   (9)在已知為麻痺之患者，須呈極規則之曲線。
   (10)在健康者，其反應較(1)(紅紫)為大。 (11)如有錯誤即棄擲之，重洗玻璃器後，另行配製。
   C．方法：
   1．取小試管12支，列於架上。
   2．於1管加0．4％鹽水1.8c．c.，2—11管各加1c.c.
   3.12管加1％鹽水1.7c.c．
   4．取腦脊髓液0.2c.c.加於1管內混合。
   5．自1管取液1c．c．加於2管內混合。
   6．自2管取液1c．c.加於3管內混合。
   7．餘類推。
   8．至10管將所餘之1c．c．棄之，11及12管均不加腦脊髓液以為對照。
   9．每管加膠金溶液5c．c．分別混合。
   10．次日(24小時)檢其紅色之改變與否。
   11.12管須於1小時內變為白色。
   12. 11管須不變色。
   13．記號及意義：
   紅=0 紅紫=1 紫=2 藍=3 鮮藍=4 白=5
   14．作曲線如下：
  
   注意：本法所用之腦脊髓液中，均不能混存血液。
   五、結核 腦膜炎化學試驗法：
   所需試藥： 1．濃鹽酸
   2． %醛液
   3．0．06％硝酸鈉
   方法：
   1．用2—3c．c．脊髓液置於一大試管中。
   2．加15—18c．c.混鹽酸，32滴醛，震盪使之混合，置於試架中，4—5分鐘。
   3．小心加入1—2c．c．之0．06%硝酸鈉液，：使成為上層液，將此混合液，置2—3分鐘。
   4．結果：陽性：二層液之間呈紫色環。
   陰性：二層液之間呈黃綠色環或無色環。
   附表：
   幾種重要疾患中，腦脊髓液變化：