第五章 血液檢查法

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内容出处: 《實驗診斷技術提要》 图书
唯一号: 230020020230003555
颗粒名称: 第五章 血液檢查法
分类号: O536
页数: 21
页码: 49-69
摘要: 將一定倍數稀釋的血液,放於有刻度的計算室內,以顯微鏡擴大計算之,得出一定容積中的血球數,可計算一立方耗(1ccm)血液內含有的血球數。
关键词: 诊断技术 血液检查

内容

第一節血球計算法原理:將一定倍數稀釋的血液,放於有刻度的計算室內,以顯微鏡擴大計算之,得出一定容積中的血球數,可計算一立方耗(1ccm)血液內含有的血球數。
   血球計算器:有帶刻度的吸血管二支及有劃線的厚載物玻璃一片,吸血管的一端膨大,其中含有玻璃小球。紅色的為計算紅血球的吸管,白色的為計算白血球的吸管,此玻璃小球為混合血液之用。載物玻璃的中火有凹,凹上刻有劃線,分為若干方格,方格有大中小三種,大方格的周圍邊界為二劃線,大方格內共有二十五個中格,其周圍邊界亦為二劃線,中格內又分劃十六個小方格,由單劃線區分之,即一大方格內有四百個小方格,
  
  
   第十五圖 紅白血球計算室:E.為計算紅血球處L.為計算白血球處
   一、赤血球計算法:
   a.血液的採取:先用酒精棉花,消毒耳垂或指尖,然後用取血針刺破皮膚,先流出的頭一滴用乾棉擦去,以後流出的即可用。
   b.稀釋液:昇汞0.5gm硫酸鈉5.gm食鹽1.gm蒸餾水200c.c.混合溶解之,清潔保存備用(Hayeme氏溶液)。 c.操作:用計算赤血球的大吸血管,吸血到0.5度處,再吸取Ha-yeme氏液或生理食鹽水到膨大部他側101刻度處,(動作要迅速,否則血液凝固)充分震盪混合,勿令起泡,則血液成為二百倍的稀釋液。當計算時,一〓的只數〓〓小方格,即五個中方格即可,凡血球在方格的境界線上的,只算入一側,他側不要算入,以免重複(例如只算上線和左線上的,而不要計算右線和下線上的,反之亦然)吸血管的稀釋血液,在滴入計算室前,須再震盪之,然後先滴去管尖端未混合的部份,再將膨大部內的稀釋血液,輕輕滴入一滴於計算室內(不可含有氣泡),待二三分鐘血球沉澱後,用顯微鏡檢查,此時要注意接目鏡,接物鏡,反光鏡,虹彩等的適當配合。
   d.計算公式:設X=1立方粍血液內的血球數,m=所數的血球
   總數,n=血液稀釋倍數,g=所數的小方格數。則:
  
   例:80小方格內的赤血球總數為500,血液稀釋為200倍,則:
  
   簡便法:若數80小方格時可以不須特別計算,將所得的總數以100 00乘之即可,例如總數為500時以10000乘之即為5,000,000。
   血球計算器之使用後的洗滌:計算室的載物玻璃,用蒸餾水洗滌後,用軟布擦乾即可,用酒精及Ether洗滌時容易損壞,吸血管使用後,須用蒸餾水,酒精,醚洗滌三次,使其空腔乾燥,以膨大的玻璃球不沾着於空腔壁上為標準。
   二、白血球計算法(血液的採取向赤血球)
   稀釋液:冰醋酸1c.c.1%龍膽紫溶液1c.c.蒸餾水100c.c.(Tu-erk氏液)
   操作:用計算白血球的小吸管,吸取血液到0.處,再吸取Tucrk氏液到膨大他側口處,則血液稀釋為20倍,赤血球因Tuerk氏液內的醋酸關係而透明,在顯微鏡下,不能看見。視野內只有白血球,因龍膽紫的存在,而染為紫色。
   算式:一大方格面積為1mm2,計算盤深度為〓mm.則體積為〓mm3.。又稀釋度為20倍,故一大方格中之數為〓×〓=〓mm3.血液中之數,須以所得之數乘二百始為一mm3.血中之白血球數,今數四大方格,則以其和乘五十即可得所求之數。
   簡便法:將四大方格內之總數以50乘之即得,例如總數為160時,以50乘之即得8,000。
   第二節 血小板計算法
   用品:14%硫酸鎂,Giemsa原液,甲醇,顯微鏡及Ehrlich's視野縮小器(如無視野縮小器可用厚紙片其中作一正方形小孔而代替之)
   預備:先計算赤血球數。
   方法:
   1.加一滴硫酸鎂溶液於指尖,以針貫通液滴,輕刺皮膚,或於耳垂之刺口(已停止出血)加硫酸鎂一滴輕壓迫之,使微量血液流出。
   2.以細玻璃棒混合之。
   3.以混合液作塗布標本。
   4.乾燥。
   5.甲醇內固定3—5分鐘。
   6.Giemsa原液二滴加蒸餾水1c.c.以此稀釋液染色一小時。
   7.水洗乾燥,於接目鏡內置視野縮小器,並用油鏡檢視之。
   8.於標本之距離較遠的四個地方,檢視每個地方,連續移動視野計數,以赤血球250個為限,血小板大小為2—3u內部有紫紅色Azure顆粒,其周圍為淡藍色。
   計算公式:
  
   E=1ccm赤血球數E,=本標本中所計算之赤血球數(1000)P=本標本中所計算之血小板總數。 P,1ccm二lCm血內之血小板數。
   第三節 血色素量檢查法(Hgb%)
   (1)Sahli氏法
   原理:以一定濃度的血色素作標準,將被檢的血液的血色素和鹽酸混合,使成為鹽酸血色素,再加水稀釋之,使其色的濃度和標準血色素相等,此時血色素的稀釋度即代表被檢者血色素量。
   Sahli氏血色計的構造:有標準血色素濃淡之玻璃,另有共分為140刻度的玻璃管其容積為2.8c.c.,每刻度0.02c.c.此外為一吸血的吸管,從尖端起共分為20刻度,他端有橡皮管一條,以備放於口中吸取血液。
   操作:在有刻度的玻璃管內加以〓鹽酸(此鹽酸等於0.365%)到刻度10處,再以吸血管吸取血液到20刻度處,迅速的吹入於加鹽酸的刻度管中震盪混合之,一分鐘後,以吸管,加水稀釋之,到色度與標準管的色度相同為止,看管內的稀釋液高度是多少,即為血色素的百分數。以上的檢查,在血液加入鹽酸液內後,經一分鐘即須加水稀釋,若時間過長時,鹽酸血色素的色度發生變化,所以臨床上操作,用於混合的時間,不可超過一分鐘以上,此外若將測定管內鹽酸和血液混合後,放於30—60℃水浴內,浸15分鐘以上,然後以玻璃棒慢慢攪拌之,加水稀釋,則所形成的鹽酸血色素色度常一定不變。
   血色素增加見於赤血球過多症,進行的結核患者,心臟衰弱症,因各種原因致血液濃度增加者,如霍亂病人,劇瀉患者,減少時見於一切貧血症,正常女為70—90,男為90—100。
   (2)Tallqvist氏法:
   A.器械:Tallqvist氏血色素比色表,此比色表甚簡單,用深淺不同之紅色紙十條,依次排列而成,各條中央有小孔,以爲檢查時比色之用,並外帶小條白色濾紙一本。
   B.方法:在滅菌手續下,刺破耳垂或指尖,以白濾紙條取血一滴,滴於濾紙之中央,俟其濕之,光亮消失,即與各種紅色紙條比較之,使兩色相等,讀標準紙條旁之數字,即血色素之百分數。 血色素指數
   血色素指數,是表明赤血球所含血色素量的多少,正常數為0.9—1.1。
   計算法:先求得赤血球數及血色素百分數,由下列公式計算之,公式如下:
  
   第四節 血象檢查法
   血片標本的製作:取血與數血球時相同,每做標本時,出血後須用乾棉花拭一次,用其新鮮血液,將清潔的載物玻璃,以右手拇指及示指保持之,左手的中指及拇指持另一載物玻璃,以此玻璃的下方邊沿部,與血滴接觸之,俟血液附着於其上,然後再將載物玻璃之附着血液部,放於右手載物玻璃的一端,兩者作成45度的角度,向載物玻璃的他端推進,則血液隨載物玻璃的邊緣分佈於載物玻璃上,成一薄腦,若兩者所作角度大時,則塗抹的血液層較厚,反之則薄。
   染色法:用Giemsa氏或Wright氏染色法。
   一、赤血球的形態
   1.正常赤血球:直徑7.5u厚2u,近圓形,無核,而易被酸性染料染色,染成伊紅之紅色,同樣大小,同樣着色。
   2.病的赤血球:赤血球大小不均,在貧血時見之。
   異形或多形赤血球:為不正形之赤血球,往往呈棍棒、樹葉、梨狀等見於失血後。
   嗜多色性:正常赤血球只取酸性色素,此種赤血球除伊紅之外,對於齡性美藍也可以染色,因此赤血球成藍色的色調,此為赤血球之幼稚階級,乃為補充貧血之需要,是為貧血之再生現象,表示它的預後是佳良的。
   色素缺乏:赤血球中央顏色淡,見於續發性貧血及萎黃病。
   鹼性染色小點:赤血球內有散在性藍色鹼性小點,見於種種貧血,尤以敗血症、梅毒、鉛中毒、瘧疾等常見之。
   染色質細粒:為單獨或成雙之紅色細粒,每見於赤血球之邊緣,為貧血之證。
   半月狀體:為赤血球溶解之基質、如瘧疾、錐蟲病、斑疹傷寒、縧蟲病、鉛中毒、貧血等均可見之。
   巨大含核赤血球:其直徑較正常者大,核缺乏染色質,着色不濃,其周圍之細胞漿,呈嗜多色性,為赤血球之最幼稚者,見於惡性貧血,骨髓性白血病。
   血色素缺乏之含核赤血球:為正常赤血球之前級,其原形質呈藍色,核邊緣不正,呈放綫狀分裂形,在高度進行變性病變,及骨髓受重大損傷時見之。
   Howell-Tolly氏體:赤血球內,有時發生紫紅色,帽針頭大小體,普通為一個,有時多至2—3個,為赤血球的退行性病變,在脾臟剔去後之血片塗抹標本,最常見之。
   卡氏(Cabot)環:在赤血球內,為圓形或“〇〇”形之紫色細綫,赤紫色不充分時,不著明,反而現為白色陰影,為赤血球之變性現象,見於重症貧血。
   Schurffner氏斑:為赤血球中之紅紫色散在性斑點,多與瘧疾寄生蟲同時存在,尤以三日瘧,為最顯著。
   二、白血球的形態
   1.正常白血球
   A.大單核白血球及移行型:其核之形態不定,為圓形、橢圓形、腎臟形、馬蹄鐵形不等,核染質少,作細網狀構造,着色較淡,原形質較他種白血球為大,Giemsa氏染色,呈淡藍灰色,不像淋巴球之原形質呈天藍色,又其中含有多數極微細紫紅色顆粒狀物,倘染色稍弱,此顆粒狀物即消失,圓形核、橢圓形核、腎臟形核者,為大單核白血球,馬蹄形核者,為移行型,其直徑較中性白血球,約大一倍,健康人之百分率為2—6%。在慢性傳染病,如肺結核、慢性收血症等,或急性傳染病,將癒時常見,其增多似以體內免疫性並行。
   B.淋巴球:亦為單核之白血球,其體大於赤血球之一倍半,核圓形,Giemsa氏染色,核呈紫紅色,邊緣平滑。原形質呈天藍色,不含顆粒,但間有見紫色小點者,為細胞顆粒體。健康人之百分率為25—33%。其增減與傳染病及炎症性疾病之預後,極有關係。而其增減常與大單核白血球並行。倘對一病人,白血球計算前後相等,而淋巴球百分率增多,是為疾病將癒之徵,反之則病勢兇惡。
   C.嗜伊紅白血球:較中性白色球略大,約為赤血球之二倍,核形雖與中性者相同,然其分裂不出二個以上,原形質對於酸性色素,尤以伊紅染色佳良,有多數紅色美麗之粗大顆粒,極易辨識,在無色標本上,顆粒發著明光輝。健康人之百分率為1—4%,其增減與鑑別診斷及預後决定價值很大。在急性傳染病經過中,檢查其減少消失之程度,以决定其預後之良否。
   Nathar-larricr;Parva Wrigh諸氏證明,凡於植物性神經,受刺激之各種原因,如Pilocarpin之應用,腸胃氣管及皮膚等疾病、過敏症,均可使嗜伊紅白血球增多,在重症急性傳染病,則減少或消失,據Staubli氏說,此為細菌毒素,過度刺激製血球臟器,致起產生障礙之結果。
   D.嗜鹼性白血球:體與伊紅者大小相等.,核的內部構造不明,缺乏染色質,分葉的現象不著明,呈深紫紅色,原形質呈青紅色,含有黑紫色粗大顆粒,對鹼性色素易着色,顆粒在水內易溶解,經染色後消失,健康人之百分率為0.25—0.5%,在臨床上無甚價值,在骨髓性白血病、血液過多症、血友病、敗血症等時可增多。
   E.多形核嗜中性白血球:大小與嗜伊紅者相等,Giemsa染色,原形質呈白色,或淺藍紅色,含極細紅色以至紫紅色之顆粒,核與原形質分界鮮明,呈深紫色,所當注意者,核之形狀,視白血球成熟與否而異,健康人之百分率為60—70%。此種血球的增減,可左右白血球的總數,於臨床診斷上意義重大。 2.病的白血球
   骨髓母細胞:核極大,內含二至四個空泡,原形質量極少,Gi emsa染色呈藍色,對過氧化酶反應為陽性,本細胞為白血球中最幼稚者,生理上僅見於骨髓內,若出現於末梢血液中,即為骨髓性白血病之證。
   前骨髓細胞:核為圓形,原形質用Giemsa染色呈極淡藍色,不含顆粒,而只含阿咀耳青色前顆粒(Azurophile),本細胞由骨髓母細胞進化而來,可再進化為中性,酸性,鹼性骨髓細胞,見於骨髓內及骨髓性白血病之血液中。
   骨髓細胞:由前骨髓細胞進化而來,核為圓形或腎形,着色較成熟之中性白血球為淡,原形質顆粒着色亦較淡,其數稀少,而代以淡紅色阿咀耳青性顆粒質,此為顆粒之前級物,此種白血球在健康人之血液中决不可見,除見於骨髓性白血病外,亦見於重症傳染病時,中性白血球核高度左移時。
   次骨髓細胞:由骨髓細胞進化而來,為桿狀核中性白血球之前級,生理上亦見於骨髓內,但在健康人血液中,偶或見之,其數必在1%以內。體較成熟中性白血球為大,原形質與其中顆粒之着色,則與之略同,惟核着色較成熟者色淡,核之陷凹,比桿狀核尤淺,狀似香腸。在急性炎症時,中性白血球核左移時增加。
   不常見之白血球:
   淋巴母細胞:為淋巴球之最幼稚者,僅見於淋巴性白血病,其形態與骨髓母細胞不易區別,但可用氧化酶反應鑑別之(本細胞氧化酶反應為陰性)。
   漿細胞:此細胞發生於淋巴腺,其形態與淋巴球相似,原形質為籃色,多含有空泡,無顆粒,核類圓形,而呈放線狀,核不在中心,而在邊緣,在臨床上無價值。
   塗氏刺激細胞:此細胞發生於骨髓,與漿細胞酷似,惟核居中央,當骨髓發生刺激症狀時見之。 內皮細胞:為具有尖尾之長大細胞,大單核白血球之前級物。
   白血球之產生如下表:
  
   第五節 白血球核之推移現象
   中性白血球之核,自母細胞以至成熟,漸由圓形,而成二,三,四,五分葉,即一核之白血球為最幼稚,核愈多為愈老。 Arneth氏於白血球分類中,以核分葉之多寡,分為Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ五類,自左而右排為一列,即愈成熟之白血球愈居右,若血液內幼稚型白血球增多時,則為向左推移,若細胞核之分葉著明增多時,為向右推移。健康人之百分數為:Ⅰ5%Ⅱ35%Ⅲ41%Ⅳ17%Ⅴ2%。
   1.進行性左移:
   幼稚細胞增多,白血球總數,及中性白血球之百分率亦增多,此為進行性左移。
   中性白血球左移程度之強弱,與症狀之輕重所並行,愈左移症狀愈重,在急性傳染病,左移程度弱,則病人自覺症狀雖重,於預後可無憂慮,反之,左移程度強,則自覺症狀雖輕,其預後終不良。
   高度進行性左移之病,在各種重症傳染病,尤以肺炎、白喉、腥紅熱、霍亂、細菌性赤痢、丹毒、流行性腦膜炎、天花、瘧疾(各種急性病發高熱時)進行性敗血症病變,例如膿胸、肝膿瘍、穿孔性盲腸炎、肋膜炎、胆道尿道之化膿性炎症、眼耳喉腦之新鮮化膿病灶、產褥熱。重症中毒:例如細菌毒、鉛中毒、昇汞毒、煤氣毒。
   2.退行性左移:
   僅捍狀核中性白血球增加,而非眞正之幼稚細胞增加,同時白血球總數減少,中性白血球之百分率亦減少,此謂退行性左移。
   退行性左移,為白血球之製造機關機能減退,如傷寒、黑熱病。
   3.右移:
   白血球總數減少,中性細胞之桿狀核百分率亦減少,幾皆為最熟之節片狀核,此通稱曰右移,為極少見之血象,惟惡性貧血、壞血病、脚氣等見之。
   第六節 白血球過多症與減少症
   白血球過多症與減少症
  
   第七節 白血球分類與結核病之關係
   A、中性白血球在35%以上,而淋巴球在25%以下,則表示有膿毒,病情惡劣;若大單核白血球同時增加,則更表示有新生之結核,病情愈見惡劣。
   B、若僅大單核白血球增加,中性白血球不增加,則表示有新生之結核,而無膿毒,病情較為佳良。
   C、若淋巴球之數目增加,漸與中性白血球之數目相近,同時大單核白血球不見增加(10%以下),是表示結核患區癒合,同時無新結核發生,病屬佳良。
   第八節 中性白血球之百分率與蟲樣突起炎之關係
   (1)蟲樣突起炎白血球不增多,預後不良。
   (2)中性白血球在75%以下,預後佳良。
   (3)在75—85%之間,為手術適應之境界。
   (4)在85—90%之間,可速行手術。
   (5)在99%以上,有起腹膜炎之疑。
   第九節由白血球之變化,而觀察病勢及推測預後之標準
   A.由嗜酸性白血球以觀察預後:
   (1)酸性白血球消失,或只厚滴可見之,白血球總數增多,是為重症。
   (2)酸性白血球消失,在厚滴亦不能見之,淋巴球減少,則預後不良。
   (3)酸性白血球存在,預後良好。
   (4)酸性白血球完全消失後,再發現,或其減少後見增多,同時中性白血球先增多,後減少,淋巴球先減少,後增多,則預後極良好。
   B.由中性白血球以觀察預後:
   (1)中性白血球輕度左移,白血球總數略增,酸性白血球存在,則預後良好。
   (2)中性白血球高度左移,白血球總數增多,酸性白血球減少,則預後尚無不良之處。
   (3)中性白血球高度左移,白血球總數增多,酸性白血球完全消失,淋巴球減少,則預後不良。
   (4)中性白血球高度左移,白血球總數減少,酸性白血球完全消失,淋巴球減少,則預後絕對險惡。
   (5)中性白血球高度左移,甚至骨髓細胞持續存在,則預後不良。
   (6)中性白血球左移程度逐漸加劇,同時酸性白血球減少或消失,白血球總數逐漸減少,則預後不良。
   (7)中性白血球高度左移,其後左移程度漸退,同時酸性白血球消失,後再發現,或減少後再增加,則預後良好。
   C.以淋巴球觀察預後
   (1)淋巴球非常減少,白血球總數持續增多,則為重症。
   (2)淋巴球非常減少,白血球總數減少,中性白血球左移漸劇,則預後絕對險惡。
   (3)淋巴球逐漸增多,同時白血球總數增多,則預後良好。
   (4)淋巴球先減少後增多,中性白血球先增多後減少,同時酸性白血球存在,則預後非常良好。
   大單核白血球與預後關係,因其數小,無若何價值;但細菌性、中毒性、炎症等病,若其數減少後再增加,表示預後隹良之徵。 第十節 出血時間
   Duke's法:
   預備:濾紙片及時錶。
   方法:
   (1)以取血針刺破指頭或耳垂。(傷口不宜過小,否則血液不能自然流出,大小以1—2mm為宜)
   (2)將新鮮流出之血滴,以濾紙吸取之(僅於血頂接觸)。
   (3)每隔30秒鐘吸血一次,每次的血滴,按先後次序排而成列。
   (4)直至出血自然停止為止。
   (5)以濾紙上血滴總數與時間相乘,則得出血時間。
   附註:
   (1)正常出血時間,本法試驗為1—3分鐘。有時延長至8分鐘,於若干貧血症,其流血時間,更為延滯,有長至5—10分鐘者。
   毛細管法:備潔淨玻璃毛細管,直徑為1.5mm,用口吸滿血液,每隔一分鐘,折斷毛細管一小段,如發現血液凝固,則於折斷毛細管兩端之空隙間,有纖維絲之交織,其距離為5mm。
   靜脈採血法:
   1.用小注射針筒,先用滅菌食鹽水冲洗之,一面備小試管,內徑為8mm,亦用滅菌食鹽水洗之。
   2.抽血1.0c.c.,將針頭除去,迅速將血液射入管內,記錄其時間。
   3.此時室溫在20—32℃間,則試管置於室溫中即可,否則將試管置於20—25℃溫水中。
   4.每隔15秒鐘傾斜一次,直至血液凝固,而倒置不動為止,從針筒採血至血液凝固,或成塊之時間,即凝血時間,正常為5—8分鐘,平均為6〓分鐘。
   異常凝血:原因頗多,主要有下列數種:
   1.肝臟疾患或機能障礙,則不能充分釋放纖維蛋白元於血液中,致血凝較慢,蓋肝為製造凝血活素之主要器官。 2.身體缺乏Vitamin K,或肝臟失常,皆能使凝血素元降低,而致出血不止。
   3.血小板異常安定,像血友病一樣。
   4.凡能阻止纖維蛋白元,變為纖維蛋白者,即具有抗凝血之作用,如胃蛋白酶、蛋白脨、及胰蛋白等。
   第十一節 血型
   健康人之血清內,含有一種正常之血球凝集素(與免疫無關之凝集素),能凝他人之血球,因此按其互相關係,可區別為A.B.AB.O四種血型,血型與輸血之選擇甚為重要,各型血清內,所含之血球凝集素,及各型血球所含之凝集元,亦不相同,A型血清內,含B凝集素, A型赤血球含A凝集元,B型血清內含A凝集素,B型赤血球內含B凝集元,O型血清內含AP凝集素,O型赤血球不含任何凝集素元,O型之血液可輸與其他各型之體內,稱為萬能給血者,否則必須同一血型方可彼此輸血,給血者之血球,切不可為受血者之血清凝集,若發生凝集時,在輸血後數分鐘,患者發生眩暈、呼吸困難、痙摩、嘔吐、下痢、譫妄、心臟衰弱虛脫而死。
   受血者與給血者之適合關係:
  
   第 十 六 圖 a.血型檢查法:取既知之A型血清一滴,置於載物玻璃片右方,再取已知之B型血清一滴,置於載物玻璃片之中央(以上二種血清稱為標準血清),次自被檢者之耳垂或手指,採取血液一小滴,分別滴入上記血清內,混合之,如被檢者為AB型,則在1—3分鐘內,必雙方均起凝集反應,如在右側起凝集反應,當屬B型,僅中央起凝集反應,則為A型,雙方均不起凝集反應者,為O型,甚易鑑別,如下表:
  
   b.標準血清之製法:以無菌汴射器自A及B型之人體肘靜脈,各取數公撮,分別注於試管中,斜置桌上,在37℃室溫處放置半小時,待其凝固,用白金耳或細鐵絲,將附於管壁之血塊,輕之剝離,即有血清析出,將此血清,傾於另一試管中,更用遠心沉澱器,使血清沉澱,則上層皆屬透明之血清,各加滅菌生理食鹽水二三倍稀釋之,更加0.5%石炭酸防腐,此即為標準血清,為便於貯藏起見,將其吸入於毛細管中,而封閉之。並記上A,B型符號,以資鑑別(此標準血清貯於冰內,可保存一年),或將血清,預先滴於載物玻璃片上,使之乾燥,貯藏於清潔之容器中,臨用時,注加生理食鹽水一滴稀釋之。
   c.輸血前的直接配合檢查法: 取生理食鹽水一滴於載物玻片上,自受血者之耳垂取血二滴,滴於此食鹽水中而混合之,然後加入氯仿二滴,用玻璃棒充分攪拌之,直待血球破壞,及氯仿揮發為止,再加入輸血者之血液一小滴,攪拌均勻,視其發生凝集與否。 b.血型檢查時之錯誤反應及其避免方法:
   1.假性凝集反應——往往取自各種病理狀態,顯著之傳染病患者以及妊娠婦女之血液,其赤血球急速沉降,每現許多赤血球包捆作錢狀之結合,此種現象,每認為凝集反應,實即假性凝集反應,若將標準血清稀釋3—1倍,即可避免此項反應。
   2.寒冷凝集反應——赤血球混懸液,加標準血清後,於通常室溫37℃不生凝集,而在0℃左右,每使O型血型發生凝集反應,此種現象為寒冷凝集反應,此乃由於赤血球內,含有一種寒冷凝集元(K),血清中含有凝集素(X)之關係,此二者在0℃左右方可發生凝集作用。即20℃以上或37℃左右則失去凝集能力,如欲避免此種現象,除在室溫下進行外,在製造標準血清時,可將凝血置於冰箱中24小時,使血清之寒冷凝集素,被其赤血球吸收殆盡,若經此項操作,所得之標準血清,則不致有寒冷凝集素之發生。
   3.Thomson氏現象——1926年Thomson氏將O型血球,在室溫內放置一夜,用A與B血清作用,現AB型,是為Thomson氏現象,或Thomson氏凝集反應。其後發現係有幾種細菌,附着於赤血球,使各型血球變性所致。日人中館氏稱Thomson氏現象為普通凝集反應,氏謂陳舊人血球,含有普通凝集元,正常人血清中含有普遍凝集素。
   因Thomson氏現象,只能在室溫乃至0℃間發生,37℃時不現,故可將標本移至37℃情况上,以避免之,同時赤血球懸浮液,不可經時太久,以愈新鮮愈好。
   第十二節 Rh因素
   1940年Landsteiner與Wiener二氏以Macacarhesus猴子之紅血球,注入家兔或豚鼠靜脈中,家兔血清內,就產生一種抵抗此種之外來之物質,此種物質,為一種凝集素,亦稱抗體。當第二次注入猴血時,此.種抗體,遇到猴紅血球,就發生凝集作用,是為抗Rh體(Anti rhesus),促成此種反應紅血球內的凝集元,就稱做“Rh因素”,猴子本身是Rh陽性,缺乏此種因素,稱為Rh陰性,以後氏等將此種凝集素,與人之紅血球混合,具有此種因素者,即Rh陽性,缺乏此種因素即為陰性。(白人陰性者15%華人陰性者0.62%。
   Rh陰性者,對於Rn陽性,能起感受作用,如有此患者,受到同型輸血,或O型血,於數次輸血之後,就發生輸血上的異型症,也許就是此種Rh因素,而它也可能發生於孕婦第一次輸血時,或發生新懷孕之婦女,她本身雖為Rh陰性,而其胎兒之紅血球,則屬於Rh陽性,這是一種遺傳特性,所以在此類病例中,其父親一定是Rh陽性,胎兒紅血球為Rh陽性,Rh凝集元由胎兒循環漏入母體血循環後,母體血清中,就產生抵抗Rh因素之凝集素,而此種凝集素,對於胎兒之紅血球,再起作用,就發生哈兒紅血球破碎症(Enythroblastosis fetalis)
   Rh因素之檢查
   檢查Rh因素時,必須獲得Rh陽性之紅血球,及抗Rh之血清,此種抗Rh血清,可由
   (1)含有抗Rh凝集素人之血清,因輸血時發生溶血反應的病人得之,或由嬰兒患有胎兒紅血球破碎症之母體。
   (2)用Macaea rhesus猴子,Rh十的紅血球,注射於豚鼠體內,而獲得抗Rh之血清。其法如下:
   抗Rh血清之製法:
   1.用Macacarhesus猴子之血液,於消毒之檸檬酸鹽水中,以免其凝固。 2.用生理食鹽水,冲洗2—3次,〓去上液。
   3.用生理食鹽水,製成20%之紅血球混合液。
   4.選擇10隻豚鼠,用此液5c.c.作腹膜下注射,每隔五日,注射一次,共五次。
   5.最後一次,一星期內,將豚鼠放血,分別收集其血清。
   6.將血清作個別Rh凝集素之滴定。
   7.取最滿意者,置於56℃水中浴15分鐘,以減其活動性,成為非活動性之血清。
   8.於每2c.c.之血清中,加0.5c.c.巳冲洗A型血球液,及0.5c.c.已冲洗B型血球液,以吸收血清中抗A或B之凝集素。
   9.任其立置室溫一小時,再作離心沉澱,分離血清。
   10.於每c.c.血清中加0.2c.c.1:1000 Merthiolate水溶液,作為防腐劑。
   方法:
   1.將檢查之血液先製成2%新鮮冲洗紅血球生理食鹽水之混合液。
   2.在小試管(內徑為7mm)中,加入二滴稀釋之豚鼠抗Rh血清,及一滴紅血球混合液。
   3.調和後置於37℃之水浴中,歷一小時。
   4.最好用手執透視鏡檢查管底,注意其沉渣是否為緊密光滑,抑或瀰漫粗糙。此時將玻管移至顯微鏡之凹面鏡上,用螢光燈觀察,最為方便。沉渣呈圓形,其邊緣光滑,是為陰性反應,沉渣大而外形呈皺摺狀,則為陽性反應。
   6.取出少許於載物玻片上,用顯微鏡檢查,陰性者僅於血球中有一淡暈狀,陽性者於血球中着深色之暈,且擴大至血狀邊緣處,而呈皺摺狀。
   第十三節 赤血球沉降速度測定法
   實施法:
   1.在早晨九時空腹時,以2c.c.Tuberculin注射器,吸取0.4c.c.3.8%枸櫞酸鈉液。
   2.次在肘靜脈,以上述之注射器,吸血1.6c.c.(即至2c.c.處)。
   3.後移入小試管中震盪混合4—5分,裝置精密Pipet內,靜置垂直立於架上,血液裝至Pipet的零度即含1c.c.血液,一般在17°—20℃室溫放置。Pipet管長30cm,直徑3mm.由上至下劃分為200 mm(由0—200)。
   4.此時觀察血球之沉降,以血清與血球之距離為記載數,由0—1小時,2小時,24小時,各記一次,共記三次。
   正常價:
   1.一小時後的數目:男子平均1—3m m女子3—7mm小兒1
   5mm,三歲3—7mm,4—6歲5—3mm,7—8歲3—4mm,9—14歲2—3mm。
   2.二小時後的數目:男子平均2—6mm。
   女子平均4—8mm 。
   中等價:
   1.一般的以一小時後測量數為Amm,二小時為Bmm,血球沉降之中等度公式
  
   2.健康男子中等價平均2—6mm,女子:4—8mm。
  
   有急性結核時每8—14天測定一次,可供推測預後。
   最終價:
   二十四小時後測定數(有時至8小時血球再下沉),健康男子之最終價50—80mm(40—70mm),女子60—90mm。
   病理的加速:如傳染病,炎症,惡性腫腸,外傷,糖尿病,異種蛋白注射後,貧血,Nephosis,炎症關節病,急慢性肺疾病。結核患者,沉降速度減少時,為硬化治癒機轉,如加速時則表示病灶進行。
   生理加速:姙娠,月經期,小兒。
   沉降遲延時:如心臟性鬱血,黃疽,肝臟實質病。

知识出处

實驗診斷技術提要

《實驗診斷技術提要》

實驗診斷技術提要该书主要详细介绍了重庆市医学实验诊断技术。

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