第三節 化學檢查

知识类型: 析出资源
查看原文
内容出处: 《實驗診斷技術提要》 图书
唯一号: 230020020230003537
颗粒名称: 第三節 化學檢查
分类号: O536
页数: 15
页码: 6-20
摘要: 此法比硝酸法準確,試藥為5份硫酸鎂飽和液加一份純硝酸,試驗方法相同,如含蛋白質,則呈白環狀。如於2—3分鐘後,而現白環,則為貝斯·琼(BenCe Jones)蛋白質,此種蛋白質出現,多見於多發性骨髓瘤,慢性白血病,骨質軟化病,慢性腎臟炎,以及健康者高血壓。
关键词: 诊断技术 尿液 化学检查

内容

一、蛋白質 凡依溷濁度而判定者,被檢尿必須澄清,澄清法:
   (1)濾過(大多在濾過後即可澄清)。
   (2)滴加醋酸數滴使成為酸性,再加〓至〓量的氧化鎂強度震盪後濾過之(如此則細菌尿時菌體被鎂吸着)。
   定性試驗
   所需試藥:
   1.磺基水楊酸Sulfosalicylic acid法:(至0.001%亦能檢出)
   醋酸(鹼性及中性尿時滴加2—3滴使成酸性)
   20%磺基水楊酸
   方法:約5c.c.酸性被檢尿於試驗管中,滴加20%磺基水楊酸2—8滴,如有蛋白質時,則生雲烟狀的白色溷濁。
   注意:a.此白色溷濁加熱或酒精亦不溶解。蛋白脨(Albumose)的白色溷濁加熱時溶解,又樹脂類的白色溷濁加酒精時溶解。
   b.必須要和對照管對比觀察,此時如置黑色背景容易觀察。
   2.煮沸法:(至0.003%亦能檢出)
   所需試藥:
   醋酸(鹼性及中性尿時,滴加2—3滴使成酸性)
   方法:酸性被檢尿約5c.c.置於試驗管中煑沸之,如有蛋白質時,則起溷濁。加入稀硝酸其溷濁並不消失。
   注意:a.有磷酸鹽及炭酸鹽時亦生溷濁,但加稀硝酸1—2c.c.則變為透明。
   b.如加飽和食鹽水數滴煑沸時,則反應更為明顯。
   3.硝酸法:(至0.003%亦能檢出) 所需試藥:濃硝酸
   方法:取濃硝酸3c.c.於試驗管中,保持於斜位,然後將被檢尿以滴管徐徐沿管壁滴下,重疊於濃硝酸平面之上。如有蛋白質時,則二液之接觸部生白色環狀的溷濁層。
   注意:a.如蛋白質微量時,必須相當時間。
   b.蛋白質過多時,生各種各樣沉澱物。
   4.Roberts氏法:
   此法比硝酸法準確,試藥為5份硫酸鎂飽和液加一份純硝酸,試驗方法相同,如含蛋白質,則呈白環狀。如於2—3分鐘後,而現白環,則為貝斯·琼(BenCe Jones)蛋白質,此種蛋白質出現,多見於多發性骨髓瘤,慢性白血病,骨質軟化病,慢性腎臟炎,以及健康者高血壓。
   注意:初蛋白䏡Primary protecse及麝香草酚等藥物,皆可現同樣白色溷濁。
  
   第二圖Eshach氏蛋白定量計
   定量試驗
   1.E bach氏法:
   所需試藥:Esbach氏試藥(貯於褐色瓶中)苦味酸(Picric acid)1.0gm.醋酸2.0gm.溶解於100..水中。醋酸(鹼性及中性尿時滴加2—3滴,使成為酸性)
   方法:加被檢尿於Esbach氏蛋白定量計的U處,再加試藥至R處,塞以橡皮栓輕微震盪後,將試驗管直立放置於24小時後,讀沉澱之高(蛋白質多時可將尿稀釋2—3倍,計算時以沉澱之高乘稀釋度數)即為千分(‰)之幾公分。
   注意:a.被檢尿必須用酸性。鹼性尿不生沉澱。
   b.被檢尿的比重必須在1006—1008之間。如高於008時,以水稀釋之。其稀釋法如下:
   c.室溫不可低於18℃以下(鹽類溶解不充分時有沉澱)。
   d.蛋白量過多經過稀釋時,以沉澱之度數乘稀釋之度數,即可算出。
   e.奎寧,膺鹼多量服用後可生非蛋白的沉澱。
   2.Kingsbury氏法:
   所需試藥:3%磺柳酸Sulfosalicylic acid水溶液。加尿2.5c.c.,試藥7.5c.c.於Kingsbury氏標準定量計中,使二液平均混合,靜置5分鐘,則標準計即發生溷濁現象,詳檢管內所含每百c.c.尿液中,蛋白質所含mg(公絲)數。
   尿蛋白之臨床意義
   於尿液所見之蛋白質,為血清蛋白及血清球蛋白,統稱為尿液蛋白。通常患蛋白尿者,以下列三項原因為多:
   1.腎臟疾患:急慢性賢臟炎、腎病、腎動脈硬化症、賢結核、腎梅毒、 腫瘤、腎澱紛樣病變。
   2.腎循環障礙:充血、貧血、心臟衰弱。
   3.腎刺激症:如毒素或化學物,細菌毒素,例如白喉、肺炎、傷寒、雙鏈球菌、姙娠毒血症等。
   二、糖
   尿中如有蛋白質時,應除去後再行檢糖。除蛋白質法可採用下述三法任何一種。
   (1)由煑沸濾過(此法為用熱將蛋白質凝固冷却後濾過之)。
   ( 2)於尿中加尿量〓的飽和食鹽水及醋酸1—2滴煑沸冷却後濾過。
   (3)血炭法:加多量的血炭於尿中,更加酒精至約成為10%,好好震璗後濾過之(在震盪中蛋白質幾乎全被血炭吸着,此時尿中的血色素亦被血炭吸着,因此可作為血色素除去法)。所謂血炭,即動物炭,骨炭之良品。
   定性試驗
   1.Nylander氏法(至0.1%亦能檢出)
   所需試藥:Nylander氏試藥(貯於褐色瓶中)
  
   方法:取被檢尿約5c.c.於試驗管中,加Nylander氏試藥1c.c.輕微煑沸3—5分鐘,如有糖時,呈黑褐色,然後生黑色之沉澱。
   注意:a.本試驗應預先檢查蛋白質,如有時必須除去之。
   b.糖少時要經過5分鐘方起反應,2—3分鐘內决不能斷定為陰性。
   c.除蛋白質外,他如尿藍母、哥羅仿等之尿,亦可起陽性反應。
   d.大黃、番瀉葉、薩羅、安替比林、水楊酸、樟腦、猶羅托品等雖可起陽性,但在煑沸前即呈紅色。
   2.Trommer氏法(至0.5%亦能檢出)
   所需試藥:10%苛性鉀液
   5%硫酸銅液
   方法:取被檢尿約10c.c.置於試驗管中,加入10%苛性鉀液3—5 c.c.,再一面滴下5%硫酸銅液,一面震盪之,至絮狀開始析出時為止。在液體的上部以火焰徐徐加溫,如有糖時,在煑沸之先(60—70℃)即生黃赤色橙色之溷濁。
   注意:a.將試驗管傾斜加熱其上部,溫度的變化,徐徐進行,着色層與下層部為鮮明之對照。
   b.液體變為赤褐色而無溷濁時(透明)應視為陰性。
   c.試藥不正確時反應不明。
   d.內服水楊酸、薩羅、Benzol, Brocin,抱水氯醛、嗎啡、糖精等時,可現類似的陽性反應。 3.斑氏法(Benedict氏法)
   所需試藥:
   枸櫞酸鈉17 8gm.無水炭酸鈉Anhydrous Sodium Carbonate 100 gm.或炭酸鈉200gm.加熱溶解700c.c.水中,並濾過,一面將硫酸銅17.3gm.溶於100c.c.蒸餾水中,徐徐加入前液內,冷後加水至1000 c.c.。
   方法:在5c.c.試藥內,加8—10滴(0.5c.c.)尿,加熱煑沸兩分鐘,或用水浴加溫五分鐘,冷却後形成紅,黃,綠色時(沉澱)則為陽性。
   4.Haines氏法:
   所需試藥:Haines氏試藥(貯於褐色瓶中)
   製法:取5%氫氧化鈉液150c.c.加入結晶硫酸銅2gm.再加15c.c.甘油即成。
   方法:取Haines氏試藥數c.c.置於試管中煑沸之,加尿數滴,再行煑沸,若尿中含有葡萄糖時,可生黃色乃至赤紅之溷濁。
   據Schultze氏之實驗,此法依入尿之滴數,可測知尿中概略之糖量,下表為採取試藥4c.c.行此試驗,而示尿中糖量與滴數之關係。即加一滴尿已成上述之陽性反應者,則該尿含有2%以上之糖,加2—3滴始呈陽性反應者,則含1 —2%之糖。尿之滴數愈多,則含糖量愈少。
  
   定量試驗 斑氏( Benedict)定量試驗
   試藥配法:
   硫酸銅(純粹結晶) 18.0gm.
   炭酸鈉(結晶) 200.0gm.
   (無水炭酸鈉100gm)
   枸櫞酸鈉或鉀 200.0gm.
   硫化氰酸鉀 125.0gm.
   低鐵氰化鉀(5%) 5.0.c.c.
   蒸餾水 至1000.0c.c.
   先將炭酸納,枸櫞酸鈉,硫化氰酸鉀加熱溶於650c.c.水中,並濾過,一面將硫酸銅溶於100c.c.蒸餾水內,徐徐加入前液內,并攪拌,然後將低鐵氰化鉀液加入,冷後加蒸餾水至1000.Oc.c.此液每25.0c.c.能還原0.05gm葡萄糖,定量時即根據此計算。
   試驗法:
   1取試藥25.0c.c.置於Erlenmeyer氏燒瓶中,加10—20gm.炭酸鈉加熱煑沸。
   2用刻度滴定管吸取尿液,徐徐滴入瓶中,每次滴後將瓶液震盪混合。
   3至試液有白色之沉澱,原來藍色漸漸消失時,方再滴加尿液,惟應十分謹慎。再加數滴試液,藍色即行退盡。此時將用去之尿量加以記載,以資計算。
  
   臨床意義:
   尿中含有糖質,稱為糖尿Glycosuria,除葡萄糖外,尚有乳糖,果糖,麥芽糖及戊糖等。糖之發生大都因為血糖過高,正常血糖為90mg%,不超過160—180mg,否則尿中必有糖質。糖尿發生之原因,有下列諸種:
   1.消化器糖尿症 主要原因,為幽門閉鎖不全,食物入腸消化,速度過快。
   2.腎機能糖尿症 腎疾患。
   3.急性傳染病 如白喉,猩紅熱,肺炎,丹毒,扁桃腺炎,瘧疾等。
   4.甲狀腺機能亢進
   5.情感過度
   6.第四腦室腦底受傷
   7.腦內壓增高
   8.各種藥物能使尿液呈糖反應
   三、胆色素:
   通常於尿液中,所見者有胆紅素Bilirubin,尿胆素Urobilin及尿胆素元Urobilinogen等三種,在化學上有相互關係。
   (a)胆紅素
   證明法
   (1)Smith氏法 所需試藥:1%碘酒
   方法:取5c.c.被檢尿於試驗管中,靜靜沿試管壁注加試藥時,在重層部生綠色環層為陽性。
   注意:約一小時褪色。
   ( 2)Gmelin氏法
   所需試藥:濃硝酸,發煙硝酸。
   方法:濃硝酸3c.c.取於試驗管中,加入發煙硝酸1—2滴,將被檢尿以吸液管靜靜沿試管壁重疊於其上。有胆色素時,在兩液的接觸面,即生淡黃色,次變為紅,藍及綠色。藍色為尿藍母,綠色為胆紅素。
   注意:a.綠色輪為最重要的鑑別點。
   b.尿藍母多時,本反應近於陽性,但無綠色層。
   c.有尿胆素時生褐色輪。
   d.有Trypaflavine時呈污褐紫色。 (b)尿胆素
   Schlesinger氏法:
   所需試藥:10%氯化鈣溶液
   炭酸鈣飽和溶液
   Lu gol's液
   酒精飽和氯化鋅溶液。
   試法a.如有胆紅素,先加〓容量10%氯化鈣溶液及〓容量的炭酸鈣飽和溶液,以除去之,濾過。
   b.10c.c.被檢尿中加魯高爾氏液數滴以轉換尿胆素元。
   c.與等量酒精飽和氯化鋅溶液混合濾過。試管後面置黑色背景,於集中日光下觀之,呈帶綠色之螢光,久置之(約1—2小時)愈加顯明。
   (c)尿胆素元
   尿胆素元為尿胆素之前身,正常尿內含量極少,且極易氧化,受日光及空氣作用,即變為尿胆素,故通常臨床檢查以新鮮尿為原則。
   Ehrlich氏法:
   所需試藥:對二甲氨基苯甲醛Para-dime th yl-amine-ban zoldeh yde結晶少許溶解於20%鹽酸中,成為2%之溶液。
   被檢之新鮮尿中加〓容量之Ehrlich氏試藥,放置暗處十分鐘,如尿胆素元增加時,迅速呈現光亮深紅色。
   胆色素之臨床意義
   四.血色素
   證明法
   1.Benzidin法(至0.0003%亦能檢出)
   所需試藥:Benzidin酒精(將Benzidin按5%的比例溶解於25%酒精中,此時不能全部溶解,一部發生沉澱,用其上清液)。
   雙氧水
   醚
   方法: 首先作尿的醚抽出液(尿5c.c.加醚3c.c.好好震盪,將上層以吸管取出)。將尿的醚抽出液2c.c.取於試驗管內,加Benzidin酒精溶液1c.c.次加雙氧水1c.c.有血色素時,數秒後(有時數分鐘後)呈青綠色乃至青色。
   注意:試藥調製時,不能應用金屬製匙。
   2.Pyramidon法
   所需試藥:5%Pyramidon酒精溶液
   冰醋酸
   雙氧水
   方法取被檢尿3c.c.於試驗管中,加5%Pyramidon酒精溶液3c.c.冰醋酸4—5滴,雙氧水5—6滴,則暫時呈紫色,隨後又漸漸褪色。
   3.Phenolphthalein法(至0.00002%亦能檢出)
   所需試藥:Mayer氏試藥
  
   鋅末10 gm.加入上液中煑沸至無色並約至100c.c.趁熱濾過之。
   3%雙氧水
   方法:取被檢尿5c.c.於試驗管內,加Mayer試藥10—15,滴雙氧水8—6滴。加熱時呈硃紅色。 血色素尿之臨床意義
   血尿 主為腎臟炎,尿路的結石,腫瘍,結核等。
   血色素尿1.廣大火傷,不適合的輸血,各種熱性病中毒,黑水熱,蛇毒。
   2.化學藥劑如氯化鉀,鹼,以及毒蕈中毒。
   3.先天或後天性之溶血性貧血。4.發作性血色蛋白尿。
  
   五、重氮反應(Diazo)重氮迄未斷定究竟為何種物質,Ehrlich氏證明此物與礦基酸重氮苯Diazo-Benzol-sulfanic acid結成有色之化合物,臨床上稱此為重氮反應。
   Ehrlich氏法
   所需試藥:
  
   氨水
   方法:在重氮試驗管中加滴第二液至M線處(約3滴),第一液至S處(10c.c.),被檢尿至U線處(10c.c.)氨水至A線處(2.5c.c.)。將橡皮栓好好栓上後震盪之。有Diazo時尿之泡沫呈鮮紅色,或櫻桃紅色。
   注意:a.陰性時黃色。
   b.泡沫的櫻桃紅色漸次褪色。
   c.阿片,嗎啡,薩羅,阿托芳,鞣酸劑,胆色素等也有呈類似反應者。 d.試藥第二液需要新製者(即約可保持一日)
   e.如用0.05% Para amino-acetophenou代替氨水反應更為顯著。與重氮反應價值相同之反應如下:尿褐素元Urochromogen反應
   ( Moritz Weiss)
   所需試藥:0.1%過錳酸鉀溶液。
   方法:取稀釋尿(用水三倍稀釋)分盛於甲,乙二管內,加0.1%過錳酸鉀溶液3滴,如為陽性則與乙管相比時,顯現黃金色。
   重氮反應之臨床意義
   1.有時見於肺結核,尤以急性粟粒結核,急性結核性肺炎,最為常見,可表示病勢兇險,死亡不出數月之間。
   2.見於麻疹,可與紅疹,風疹Rubella區別。
   3.有助於傷寒之診斷,傷寒自4—5病日乃至三星期之後,即稀釋至1:50倍亦可見陽性反應。同時又可與他種熱性病,以資區別。
   4.或可呈陽性之疾患:肺炎,猩紅熱,白喉,丹毒,瘧疾,惡液質,癌腫。
   六、尿藍母Indican
   或稱Potassium indoxyl Sulfate係由Indol氧化成氧化indol然後與硫酸及鉀化合而成尿藍母。
   Jaffe氏法:所需試藥:濃鹽酸
   5%氯化鈣
   氯仿(或醚,
   方法:取被檢尿5c.c.於試驗管中,加同量的濃鹽酸震盪之,再加5%氯化鈣1—2滴,再好好震盪,加入氯仿2—3c.c.强度震盪之,有尿藍母時,氯仿染為靛藍色(indigoblue)
   注意:(1)尿著明著色時可用除色法除去色素(參照除蛋白法)
   (2)正常尿的含有量,用此法時,反應不出現。
   尿藍母之臨床意義
   七、酮體Acetone Bodies: 為脂肪新陳代謝未完全之產物,其原因為炭水化合物代謝發生障礙。酮體蓄積體內,可致酸中毒Acid-osis。
   證明法:
   1.Lange氏法:
   所需試藥:10%硝酸氰化鈉液
   濃氨水
   冰醋酸
   方法:取被檢尿3—5c.c.置於試驗管中,加10%硝酸氰化鈉3—4滴,再加冰醋酸5滴,混合震盪之。用滴管吸取氨水,徐徐沿管壁加入上層,如有醋酮者,則於二液體交界處,呈紫紅色,其深淺可示醋酮之含量。
   2.Lieben氏法
   所需試藥:Lugol氏液
   製法:將碘化鉀2.0gm.溶於100c.c.蒸餾水內,再加碘1gm.10%苛性鈉液。
   方法:取被檢尿5c.c.於試驗管中,加Lugol氏液2c.c.(成深褐色)再加苛性鈉液2c.c.有多量酮時,即刻發生白色溷濁,而有Iodo-form的特有臭氣。
   八、雙醋酸Diacetic acid:
   證明法
   Gerharat氏法 所需試藥:5%氯化鐵
   方法:取被檢尿5c.c.於試驗管中,加試藥1—2滴時,先起灰白色的沉澱。如繼續滴下有0.05%之雙醋酸時,呈葡萄酒樣深紅色。將它震盪時所生的泡沫則呈紫紅色。
   注意:阿斯匹靈,薩羅,水楊酸鈉,安替匹林等服用時,雖可呈類似反應,但加熱後無變化。雙醋酸有揮發性,加熱後即消失。
   雙醋酸之臨床意義
   1.飽食,懷孕時惡性嘔吐,驚厥。
   2.急性傳染病,肺炎,猩紅熱,麻疹。
   3.腸疾患:急性腸胃炎,腸閉塞,腹膜炎。
   4.醚麻醉後中毒,肝細胞損害等。
   5.重症糖尿病,惡液質。
   九、Ammonia定量法:
   所需試藥:0.5% PhenolphtaIeiu酒精溶液。
   氫氧化鈉規定溶液。
   蒸餾水
   Formalin
   〓氫氧化鈉液
   方法:1.以10c.c.尿置於一杯內,加50c.c.蒸餾水,再加10滴0.5%Phenolphthalein酒精溶液作指示劑,以氫氧化鈉規定液中和之(呈微紅色)。
   2.以Formalin 5c.c.置於另一杯內,加15c.c.蒸餾水混合,再如上法中和其中的酸,俟酸中和後,則加以上被中和的尿稀釋液混合之,以〓氫氧化鈉滴定之(因二液混合後游離出一種酸),如消耗1c.c.氫氧化鈉,為含有NH3.0.0017gm.以此類推(正常24小時尿中的NH3總量=0.5—1.2gm.)。
   十、氯化物定量法
   所需試藥:10%鉻酸鉀液〓硝酸銀液 蒸餾水。 方法:取尿5c.c.(若有蛋白存在時須除去之,方可開始試驗),加50—75c.c.之蒸餾水稀釋之,滴入10%鉻酸鉀液10—15滴,用〓硝酸銀液滴定至顯極淺之紅色為止。
   計算法:1.17×用去之硝酸銀c.c.數二每c.c.尿內含Nacl之mg數(正常24小時尿中含5—10 gu.)
   十一、Diastas檢查法(膵臟機能檢查)
   正常人的尿內含Diastase10—100單位,膵臟炎,膵臟腫瘍,因膵管狹窄致Diastase著明減少,其檢查法如下:
   所需試藥:1%食鹽水0.1%澱粉溶液〓碘溶液(0.254%)
   方法:(1)在試管架上立置10個試驗管,自第二管起每管加入1%食鹽水1c.c.。
   (2)在第一第二試管中各加尿1c.c.。
   (3)第二管充分震盪後取1c.c.混合液加入第三試管中。
   (4)以下順次同以上方法稀釋之至第十試管棄去1c.c.。
   (5)各管內加入0.1%澱粉液2c.c.震盪之,在38—40℃之溫水中溫浸30分鐘。
   (6)後移置冷水中冷却之,再加〓碘溶液1—3滴。判定:(1)試管中不受Diastase作用之澱粉溶液呈青色。
   (2)如受消化作用,澱粉液漸漸變赤。
   (3)受消化了的澱粉失其澱粉反應,全呈為黃色。計算:以變赤色者為標準,其變赤試管之號數,由第一順次數下:
   例如第七管赤色開始其計算法則為21二128。
   正常價為16—64單位,故第三(二8)第四(=16)第五(=32)第六(=64)為正常價的試管。
   病價在128以上為中等價。至260為高價,甚者可達2000以上。
   以上試驗經40分鐘可得結果,故可預備行急性膵臟炎之手術。在重症膵臟炎時,Diastase減少,在膵臟完全壞死時,則酵素完全消失.,此時尿糖為陽性。
   十二、藥物尿 排泄於尿中的藥物證明法 1.碘 (尿+發煙硝酸2滴+Chloroform2 c.c.)×震盪—→Ca rmin色o
   2.Bromine(尿+發煙硝酸2滴+Chloroform2c.c.)×震盪—→褐黃色。
   3.柳酸 (尿+第二鹽化鐵液3滴)一→青紫色。
   4.Antipyrin(尿+第二鹽化鐵液3滴)一→赤色。
   5.Phenacetiu(尿+第二鹽化鐵液3滴)—→褐色。
   6.Tannin(尿+第二鹽化鐵液3滴)一→黑青色。
   7.Atophan(尿+濃鹽酸1c.c.)—→鶯黃色。
   8.Naphtalin(尿+濃鹽酸1 c.c.)重疊一→(接觸面)暗綠色。
   9.大黃,番瀉葉(尿+苛性鈉1c.c.)—→紫紅色。
   10.Santoin(尿+苛性鈉1c.c.)—→紅色。
   11.Urotropin(尿。+臭水)一→黃色結晶性沉澱。
   12.規寧(尿+Ammonia+Ether)×震盪後蒸發—→殘渣
   (殘渣+ 2O2水+Chloralhydrate)—→綠色。
   13. 石炭酸 (尿+空氣長時間)一綠褐色—→黑褐色。
   第四圖(1): 尿酸結晶

知识出处

實驗診斷技術提要

《實驗診斷技術提要》

實驗診斷技術提要该书主要详细介绍了重庆市医学实验诊断技术。

阅读